أثناء استخدام محلل الكيمياء الحيوية الآلي، كثيرًا ما نواجه الحالة التالية: إجراء فحص منفردًا يعطي نتائج سليمة، لكن عند دمجه مع فحوصات معينة تظهر نتائج شاذة. السبب هو أن نظام التنظيف في الجهاز يفقد فعاليته تدريجيًا مع تراكم مدة الاستخدام، مما يزيد درجة التلوث المتبادل بين الكواشف.

يؤثر التداخل المتبادل بين الكواشف على دقة النتائج وموثوقيتها، ويُحدث انحرافات كبيرة، وقد يضلل الطبيب السريري أحيانًا ويؤخر تشخيص المرضى.

لذلك فإن تجنب التداخل بين الكواشف أمر مهم وعاجل في العمل اليومي للفحوصات الكيميائية الحيوية.

الأسباب الشائعة للتداخل

يحتوي الكاشف على الركيزة التي سيتم قياسها في الفحص التالي، أو أن أحد مكوناته يتفاعل مع ركيزة التفاعل التالي، فيتداخل مباشرة مع نتيجة القياس التالي.

والسبب الآخر أن التفاعل الذي يطلقه الكاشف يعيق بشكل غير مباشر سير التفاعل التالي، فعند وجود تلوث بالكاشف، يقيس الفحص التالي النتيجة المجمعة لتفاعلين متتاليين.

أمثلة نموذجية

① تغير pH: يؤدي حمل المخلفات بين محاليل التنظيم إلى تغير pH للتفاعل التالي، فلا يصل إلى الحالة المثلى.

مثال ذلك طريقة البيورت لقياس البروتين الكلي في المصل: مع تساوي بقية الشروط، يتطلب التفاعل ظروفًا قلوية (pH 8–9) لتتفاعل الروابط الببتيدية (—CONH—) مع محلول النحاس القلوي وتكوين المعقد البنفسجي، فتُقاس الكمية الكلية للبروتين.

إذا كان pH أقل من 8، تنخفض نتيجة البروتين الكلي كذبًا، مما يؤثر مباشرة على الجلوبولين ونسبة الألبومين/الجلوبولين. وتفاعلات الإنزيمات تكون أسرع وأعلى حساسية عند pH المثلى، لكن لأن القدرة المنظمة محدودة، فقد يُبطل التلوث المحمول نتائج التفاعلات الأنزيمية.

معظم التفاعلات الأنزيمية تعمل بين 6.0–7.5؛ بينما تحتاج ALP وγ-GT وLDH إلى ظروف قلوية.

② كواشف TG وT-CH وUA وMg تحتوي على أملاح صفراوية تتسبب في تداخل خطير مع قياس الأحماض الصفراوية بالطريقة الأنزيمية الدورانية.

③ كواشف ALT (IFCC) وAST (IFCC) تحتوي على مركبات LD عالية النشاط وقد تتداخل مع قياس LD.

④ كواشف CK (NAC-activated) وCK-MB (NAC-activated) تحتويان على Glu؛ ومبدأ القياس يشمل تفاعل الهيكسوكيناز (HK) للـGlu، لذا قد تتداخلان مع قياس Glu — وقد يكون التداخل خطيرًا خاصة بالطريقة HK.

⑤ كواشف Glu (HK) وCK (NAC-activated) وCK-MB (NAC-activated) وTG وHDL-C وLDL-C (الطريقة المباشرة) تستخدم أملاح مغنيسيوم قد تتداخل مع قياس Mg2+ لاحقًا؛ كما أن التركيز العالي من Cu2+ في كاشف TP يتداخل أيضًا مع قياس Mg2+.

⑥ كواشف ALT وAST وLDH وCK وCK-MB وUA وγ-GT وTP تحتوي على K+، ولها مسار مماثل أو معاكس للقياس الأنزيمي لـK+، فتتداخل مع نتائجه.

⑦ كواشف ChE (بيوتيريل ثيوكولين) وTC (ChOD-PAP) وGlu (GOD-PAP) وUA (Uricase) وα-HBDH (DGKC) تستخدم محاليل تنظيم فوسفاتية قد تتداخل مع قياس الفوسفور غير العضوي.

⑧ كاشف Mg2+ (Calmagite) يحتوي على EGTA، وهو مركب يلتقط Ca2+، مما قد يتداخل مع قياس الكالسيوم.

⑨ لا ينبغي قياس CK قبل ALP أو Ca، لأن EDTA-Na في محلول تفاعل CK يثبط نشاط ALP ويرتبط بالكالسيوم فتخفض النتائج.

⑩ القياس الأنزيمي لليوريا (BUN) يستهلك NADH عبر نازعة هيدروجين الجلوتامات (GLDH)، فلا يوضع مباشرة قبل الفحوصات التي ركيزتها NADH مثل ALT وAST.

اختبارات الفحص

في الواقع، النشرات المرفقة من الشركات المصنعة لا تعكس دائمًا تركيبة الكواشف بشكل كامل، والعوامل المؤثرة في التفاعلات الكيميائية الحيوية معقدة جدًا.

لذلك يصبح اكتشاف التداخل المحتمل من التلوث المتبادل عبر التجارب أكثر أهمية.

يمكن إجراء الاختبارات التالية لفحص واكتشاف التداخلات المحتملة بين الكواشف:

سبل المعالجة

بناءً على تحليل الأسباب واختبارات الفحص أعلاه، يمكن اتخاذ إجراءات موجهة لإزالة التداخل. ومن الطرق الشائعة:

كما يتعين على الفنيين الإلمام الكامل بحالة عمل الجهاز، ومراعاة احتمالية التلوث المتبادل عند اختيار فحوصات العينة أو الانتقال من آخر فحص في عينة إلى أول فحص في العينة التالية، وترتيب التسلسل بما يحقق نتائج أكثر موثوقية.

يمكن ترتيب فحوصات الكيمياء الحيوية الشائعة بالتسلسل التالي:

P، Alb، DBIL، TBIL، K، Ca، CK، TBA، TG، AFU، ALT، CK-MB، APOA1، T-CH، APOB، Cl، HDL-C، LP(a)، AST، GPDA، AMY، LDL-C، BUN، UA، CHE، ADA، γ-GT، Mg، Na، ALP، LDH، GPDA، TP، Cr.

الخاتمة

بهذه الطرق يمكن حل معظم حالات التلوث المتبادل بين الكواشف. وفي العمل الفعلي، عندما يُجري الجهاز فحوصات متعددة على التوالي، يصعب إدراك تفاصيل كل تفاعل.

يتعين علينا الإلمام الكامل بمبدأ عمل محلل الكيمياء الحيوية وأساليبه ومساره وحالته، مع تحليل معمق لتركيب الكواشف ومبادئ تفاعلها، والجمع بين التحليل النظري والتطبيق العملي للوصول إلى منهج يناسب عمل مؤسستنا.

هذا المقال منقول من "MiaoBi Biochemistry" لأغراض التبادل والتعلم فقط. وفي حال وجود أي إشكال متعلق بالحقوق، يرجى الاتصال بنا وسنتعامل معه فورًا.